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BTV-2型3型4型7型12型HPCE檢測方法的建立

高源; 黃秋華; 聶福平; 楊俊; 王昱; 艾軍; 唐昌杰; 史梅梅; 李賢良; 王國民; 胡世君 西南大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院; 重慶榮昌402460; 重慶海關(guān)技術(shù)中心重慶市進(jìn)境陸生動(dòng)物疫病防控技術(shù)研究工程中心國家牛病檢測重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 重慶江北400020; 云南海關(guān)技術(shù)中心; 云南昆明650228
  • 藍(lán)舌病毒
  • 血清型
  • 鑒別

摘要:為了建立同時(shí)鑒別檢測藍(lán)舌病毒(BTV)2型、3型、4型、7型及12型的快速方法,針對BTV不同血清型的VP2基因保守區(qū),采用GeXP原理,設(shè)計(jì)了5對特異性嵌合引物和1對通用引物,優(yōu)化建立了可單管同步鑒別BTV2型、3型、4型、7型及12型的HPCE方法。該方法僅對BTV 2型、3型、4型、7型、12型的病毒核酸有擴(kuò)增,對BTV的其他基因型以及小反芻獸疫病毒、口蹄疫病毒均無擴(kuò)增,特異性好。敏感性試驗(yàn)結(jié)果顯示:該方法對單一病毒核酸的最低檢測量為100~1000 copies/L;對五種血清型病毒混合核酸的最低檢測量為100 copies/L。組內(nèi)重復(fù)試驗(yàn)與組間重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果均一致,重復(fù)性好。臨床樣品和模擬樣品檢測結(jié)果顯示,本研究建立的HPCE方法與OIE推薦的套式RT-PCR敏感性一致,且該方法可以特異、敏感、快速地鑒別藍(lán)舌病毒(BTV)2型、3型、4型、7型及12型。

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中國獸醫(yī)科學(xué)

  • 預(yù)計(jì)1-3個(gè)月 預(yù)計(jì)審稿周期
  • 0.75 影響因子
  • 農(nóng)業(yè) 快捷分類
  • 月刊 出版周期

主管單位:中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部;主辦單位:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所

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