摘要：[目的]CRISPR/Cas9 基因編輯技術(shù)是作物遺傳改良的有效工具。本研究通過(guò)對(duì)水稻Pita、Pi21和ERF922稻瘟病相關(guān)基因進(jìn)行定點(diǎn)編輯,以期獲得能夠穩(wěn)定遺傳的抗稻瘟病水稻材料。[方法]利用 CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù),以 Pita、Pi21 和 ERF922 為靶基因,構(gòu)建共編輯載體 pC1300-2×35S::Cas9-g^Pita-g^Pi21-g^ERF922 ,用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化長(zhǎng)粒粳稻恢復(fù)系L1014,篩選獲得穩(wěn)定遺傳的純合突變體用于稻瘟病抗性鑒定。[結(jié)果]在T0代轉(zhuǎn)基因株系中,Pita、Pi21和ERF922 突變頻率分別為 75%、85%和 65%,突變基因型多為雙等位突變。篩選到的不含 T-DNA成分的T1代能夠穩(wěn)定遺傳給T2代,并從中獲得 Pi21單突變純合株系及Pita、Pi21和ERF922的三突變純合株系。稻瘟病抗性鑒定結(jié)果表明,與野生型相比,突變株系的抗性顯著提高。同時(shí),接種后純合突變體株系內(nèi)水楊酸、茉莉酸和乙烯等信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)基因的表達(dá)量均上調(diào)。據(jù)此,我們推測(cè)純合突變株系對(duì)稻瘟病的抗性增強(qiáng)可能與其對(duì)稻瘟病菌的響應(yīng)被激活有關(guān)。[結(jié)論]利用 CRISPR/Cas9 技術(shù)獲得了能夠穩(wěn)定遺傳和具有較高稻瘟病抗性的純合突變株系,為水稻稻瘟病抗性改良提供了良好的材料。