首頁 > 期刊 > 自然科學(xué)與工程技術(shù) > 醫(yī)藥衛(wèi)生科技 > 醫(yī)藥衛(wèi)生綜合 > 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào) > 椎間盤髓核細(xì)胞應(yīng)力模型中Piezo1蛋白的表達(dá) 【正文】
摘要:目的探討新型機(jī)械激活性離子通道Piezo1蛋白在人椎間盤髓核細(xì)胞應(yīng)力模型中的表達(dá)。方法將人椎間盤髓核細(xì)胞分成牽張應(yīng)力組和牽張應(yīng)力+Piezo1蛋白抑制劑組,構(gòu)建人椎間盤髓核細(xì)胞體外培養(yǎng)-應(yīng)力刺激模型,采用多通道細(xì)胞牽張應(yīng)力加載系統(tǒng)FX-4000T處理髓核細(xì)胞,兩組均加載0、2、12、24、48h的周期性牽張應(yīng)力。采用RT-PCR、Western-blot技術(shù)檢測(cè)兩組Piezo1的表達(dá)水平,應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)Piezo1蛋白熒光的強(qiáng)弱。結(jié)果 RT-PCR結(jié)果顯示,牽張應(yīng)力組給予2h周期性牽張應(yīng)力時(shí),Piezo1 mRNA表達(dá)較給予0h周期性牽張應(yīng)力時(shí)增加,給予24h周期性牽張應(yīng)力時(shí)Piezo1mRNA表達(dá)高于其他牽張應(yīng)力作用時(shí),而給予48h周期性牽張應(yīng)力時(shí)較給予24h周期性牽張應(yīng)力時(shí)降低,差異有顯著性(F=13.917,P〈0.05)。Western-blot結(jié)果顯示,牽張應(yīng)力組給予2h周期性牽張應(yīng)力時(shí)Piezo1蛋白表達(dá)較給予0h周期性牽張應(yīng)力時(shí)略有增加,給予24h周期性牽張應(yīng)力時(shí)Piezo1蛋白表達(dá)高于其他各組,而給予48h周期性牽張應(yīng)力時(shí)Piezo1蛋白表達(dá)較給予24h周期性牽張應(yīng)力時(shí)降低,差異有顯著性(F=12.781,P〈0.05)。牽張應(yīng)力+Piezo1蛋白抑制劑組Piezo1mRNA及其蛋白表達(dá)均明顯小于牽張應(yīng)力組。Piezo1蛋白表達(dá)于髓核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核,熒光較強(qiáng)。結(jié)論人椎間盤髓核細(xì)胞中Piezo1蛋白穩(wěn)定表達(dá),并且與應(yīng)力加載時(shí)間相關(guān)。
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