摘要：[目的]本研究通過對大豆水通道蛋白基因GmTIP1-1的克隆及其在不同脅迫處理下的差異表達(dá)分析,探究水通道蛋白在大豆耐受非生物脅迫中的作用機(jī)制。[方法]從大豆品種‘天隆1號’中克隆出GmTIP1-1的CDS序列,采用生物信息學(xué)方法對該基因及其編碼蛋白進(jìn)行分析。采用實(shí)時熒光定量PCR檢測在不同逆境處理下GmTIP1-1在大豆根、莖、葉等組織的表達(dá)情況。利用基因槍轟擊法對GmTIP1-1蛋白全長及不同跨膜結(jié)構(gòu)域進(jìn)行亞細(xì)胞定位分析。通過酵母雙雜試驗(yàn)確定GmTIP1-1蛋白的互作蛋白,并利用實(shí)時熒光定量PCR檢測在干旱處理下與GmTIP1-1互作蛋白基因的表達(dá)情況。[結(jié)果]GmTIP1-1的CDS序列全長為753bp,編碼250個氨基酸,等電點(diǎn)為6.51。系統(tǒng)進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn),GmTIP1-1與苜蓿(Medicago truncatula)和黃瓜(Cucumis sativus)的親緣關(guān)系十分相近。亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示,GmTIP1-1定位在細(xì)胞膜上。實(shí)時熒光定量PCR結(jié)果顯示:GmTIP1-1在根中的表達(dá)量最高,在莖中次之,葉中最低;在干旱、ABA處理下均能誘導(dǎo)GmTIP1-1基因在大豆根、莖、葉中的表達(dá);在干旱和ABA處理下,GmTIP1-1基因在根中的表達(dá)水平均高于在莖和葉中的表達(dá)水平。酵母雙雜試驗(yàn)表明,GmTIP1-1與參與非生物脅迫調(diào)節(jié)的GmSNARE蛋白以及響應(yīng)逆境脅迫相關(guān)蛋白GmF-box均存在互作。在干旱處理下,大豆根和莖中GmSNARE和GmF-box基因都會受到干旱誘導(dǎo)表達(dá)。[結(jié)論]GmTIP1-1蛋白定位于細(xì)胞膜,通過與參與非生物脅迫調(diào)節(jié)的GmSNARE蛋白以及響應(yīng)逆境脅迫相關(guān)蛋白GmF-box互作來增強(qiáng)大豆對非生物脅迫的抗性。