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催化發(fā)夾組裝用于堿基切除修復(fù)酶活性檢測(cè)研究
王濤; 湯建新; 李青 湖南工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與化學(xué)學(xué)院; 湖南株洲412007
- 催化發(fā)夾組裝
- 堿基切除修復(fù)酶
- 酶活性檢測(cè)
- 無酶信號(hào)放大
- 核酸內(nèi)切酶iv
摘要：堿基切除修復(fù)酶在DNA損傷修復(fù)過程中具有重要作用,且其檢測(cè)與癌癥等疾病的診斷相關(guān)。傳統(tǒng)的堿基切除修復(fù)酶檢測(cè)方法操作復(fù)雜、靈敏度低,且僅對(duì)酶的濃度進(jìn)行定量分析而非酶的活性。為此,建立了基于催化發(fā)夾組裝介導(dǎo)信號(hào)放大用于核酸內(nèi)切酶IV(Endo IV)活性的檢測(cè)方法。該方法利用Endo IV的活性作用于底物探針,將引發(fā)序列釋放而引發(fā)催化發(fā)夾自組裝信號(hào)放大,以實(shí)現(xiàn)Endo IV的活性檢測(cè)分析。通過熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)可知,該方法檢測(cè)下限為3.7×10-7 U/mL,可選擇性地對(duì)Endo IV的活性進(jìn)行檢測(cè),是一種設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、靈敏度高的堿基切除修復(fù)酶活性檢測(cè)方法。
- 催化發(fā)夾組裝
- 堿基切除修復(fù)酶
- 酶活性檢測(cè)
- 無酶信號(hào)放大
- 核酸內(nèi)切酶iv
摘要：堿基切除修復(fù)酶在DNA損傷修復(fù)過程中具有重要作用,且其檢測(cè)與癌癥等疾病的診斷相關(guān)。傳統(tǒng)的堿基切除修復(fù)酶檢測(cè)方法操作復(fù)雜、靈敏度低,且僅對(duì)酶的濃度進(jìn)行定量分析而非酶的活性。為此,建立了基于催化發(fā)夾組裝介導(dǎo)信號(hào)放大用于核酸內(nèi)切酶IV(Endo IV)活性的檢測(cè)方法。該方法利用Endo IV的活性作用于底物探針,將引發(fā)序列釋放而引發(fā)催化發(fā)夾自組裝信號(hào)放大,以實(shí)現(xiàn)Endo IV的活性檢測(cè)分析。通過熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)可知,該方法檢測(cè)下限為3.7×10-7 U/mL,可選擇性地對(duì)Endo IV的活性進(jìn)行檢測(cè),是一種設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、靈敏度高的堿基切除修復(fù)酶活性檢測(cè)方法。
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