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芽殖酵母細胞周期過程不同時期的定量觀測
張志溫; 李方廷 北京大學物理學院; 北京大學定量生物學中心; 北京100871
- 芽殖酵母
- 單細胞觀測
- 細胞周期
- 時間標記
摘要：在芽殖酵母中構(gòu)建CDC10-mCherry和SPC42-mCherry熒光蛋白,作為酵母細胞周期不同時期的報告系統(tǒng)。根據(jù)酵母細胞中芽環(huán)(CDC10-mCherry)的產(chǎn)生和消失以及紡錘體極體(SPC42-mCherry)的復制和分離,可以測量細胞周期中G1期、S期、EarlyM期和LateM期的時間長度。在此報告系統(tǒng)的基礎上,分別構(gòu)建S期細胞周期蛋白CLB5-GFP和M期細胞周期蛋白CLB2-GFP菌株,實現(xiàn)單細胞觀測,檢驗報告系統(tǒng)工作的穩(wěn)定性和準確性。該報告系統(tǒng)可作為研究酵母細胞周期不同時期時間長度等定量生物學問題的背景菌株。
- 芽殖酵母
- 單細胞觀測
- 細胞周期
- 時間標記
摘要：在芽殖酵母中構(gòu)建CDC10-mCherry和SPC42-mCherry熒光蛋白,作為酵母細胞周期不同時期的報告系統(tǒng)。根據(jù)酵母細胞中芽環(huán)(CDC10-mCherry)的產(chǎn)生和消失以及紡錘體極體(SPC42-mCherry)的復制和分離,可以測量細胞周期中G1期、S期、EarlyM期和LateM期的時間長度。在此報告系統(tǒng)的基礎上,分別構(gòu)建S期細胞周期蛋白CLB5-GFP和M期細胞周期蛋白CLB2-GFP菌株,實現(xiàn)單細胞觀測,檢驗報告系統(tǒng)工作的穩(wěn)定性和準確性。該報告系統(tǒng)可作為研究酵母細胞周期不同時期時間長度等定量生物學問題的背景菌株。
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